
關于核酸提取系列去了解一下
發布時間:
2021/09/15 00:00
快速核酸提取儀主要用于核酸提取、核酸蛋白提取和分離。在操作過程中,只需添加樣本核酸,儀器自動完成提取純化的整個過程,減少了提取過程中手動添加試劑過程。
拆包裝、消毒、提取核酸采樣……一系列看似簡單的操作無時無刻不在考驗著核酸采樣檢測者的細心和耐心。帶領的檢驗室有25人,平均年齡不到25周歲,每個人都夜以繼日地堅守在崗位上。
隨著分子生物學技術的快速發展,分子診斷和檢測技術如核酸雜交、核酸擴增和核酸序列分析變得越來越重要。樣品預處理占整個分析過程的60%,90%的檢測誤差發生在預處理環節。核酸的提取是分子診斷實驗的,也是最關鍵的一步。獲得的核酸質量直接影響下游分子生物學實驗的成敗。
根據的實驗,血清血漿的量與DNA提取的核酸量成正比。因而,如果要提高核酸得率,可通過增加血清或血漿的量來實現。一般地,做血漿或血清核酸提取,樣本量在1ml以上。如果1ml或更大量樣本得不到滿意的檢測結果,則應及時考慮更換提取試劑盒。
我們知道一個典型的核酸檢測過程包括兩大步驟:核酸提取和核酸擴增。而核酸提取又包括裂解和純化。對于某些樣本(比如宮頸拭子洗脫液,鼻咽拭子洗脫液等),其成分相對簡單,因此在核酸提取中可以把核酸純化步驟省略掉,因此叫免純化提取,有的也叫一步法提取。為了確保對后續PCR反應沒有明顯的抑制,這種提取方法一般也會加一步高溫讓蛋白質失活。這種提取因為沒有經過核酸純化,提取后的核酸溶液里殘留雜質較多,稍有不慎,還是會對后續的PCR反應產生抑制。但是因為相對于全提取(帶有磁珠法或者過柱法純化)而言,免純化提取步驟簡單很多,更容易實現提取的全自動,其在分子POCT領域也被經常采用。
檢測員將待檢樣本放到生物柜前,進行核酸提取。輕輕擰開采樣管蓋子,檢測員用加樣槍吸取一定量的樣本液體,再小心放進反應板中,樣本通過移液器被轉移到核酸提取板中完成轉樣,隨后放入自動化核酸提取儀中,進行核酸抽提。
核酸檢測主要分三個步驟,加樣,提取,擴增。加樣是用移液槍把樣本加到提取試劑盒里,提取是用磁珠法把核酸提取出來。擴增主要是我的,通過聚合酶鏈式反應(PCR),將病毒核酸特定片段不斷來擴增,以被儀器探測到,以此判斷是否存在病毒核酸。
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